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产品名称:SURE菌株(ZK231)

货号 规格 价格 订购数量 是否现货
ZK231 0.3ml/支 380 - + 有货

■ 产品介绍

SURE(Stop Unwanted Rearrangement Events)感受态细胞是设计用来克隆在传统菌株中无法克隆的DNA片段序列的菌株。SURE感受态菌株缺乏催化重组和删除非标准二级结构和三级结构, 例如十字形(由反向重复序列导致)和Z字形的DNA序列的组件。这些非标准二级结构和三级结构在真核细胞中经常出现,而且这些结构能够阻碍真核细胞DNA 在传统菌株中的克隆。sure感受态细胞是限制性内切酶阴性的(McrA-, McrCB-, McrF-, Mrr-, HsdR-),核酸内切酶(endA)缺陷,和重组酶(recB recJ)缺陷的。同时sure感受态细胞中所具有的F' 游离基因上面的lacIqZΔM15基因,使得能够利用蓝白斑进行克隆筛选。                  

基因型为:E. coli B e14-(McrA-) Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)171 endA1 gyrA96 thi-1 supE44 relA1 lac recB recJ sbcC umuC::Tn5 (KanR) uvrC [F' proAB lacIqZΔM15 Tn10 (TetR)].


■ 产品特点

SURE感受态细胞主要是用来克隆不稳定DNA结构,大肠杆菌DNA修复系统会针对重复序列、二级结构(如Z-DNA)等真核DNA进行重排或删除修饰。SURE感受态细胞针对uvrC,umuC,SbcC和RecJ等参与修饰的大肠杆菌基因或蛋白进行突变,提高了真核来源、不规则DNA的稳定性达20倍以上,并且适合克隆甲基化DNA。

本身具有Kana和Tet抗性。当转化氯霉素抗性质粒到sure感受态细胞中时,一定要用100μg/ml的氯霉素平板去筛选。因为sure感受态细胞在40μg/μl的氯霉素条件下具有抗性,而对于100μg/μl的氯霉素抗生素具有敏感性。

sure感受态细胞可以用于蓝白斑筛选,具有laz互补基因。

在载体构建过程中,我们经常会遇到一些基因片段具有高度的重复,这导致插入载体中的序列可能会在细菌扩增中不稳定,在质粒扩增中产生形成片段的缺失和重排,如发现插入片段高频率地产生缺失和重排,可以尝试使用重组缺陷大肠杆菌菌株,例如sure感受态细胞。


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